老鼠昼伏夜主要是避开人类的干扰，多在夜间活动，活动时靠墙根或固定物边行走，形成鼠路。褐家鼠多在100～150米范围内活动；小家鼠活动范围较小，多在栖息地30～50米内觅食、活动。黄胸鼠更善攀登；褐家鼠能垂直跳高60厘米，小家鼠也能跳高30厘米。三种家鼠均能游水，褐家鼠水性最好，能在水面浮游60～72小时，潜水30秒钟。褐家鼠有趋湿性，主栖地下层，善打洞栖居；黄胸鼠和小家鼠喜干燥，黄胸鼠主栖高层，小家鼠多靠近食源处栖居，栖居条件简单，常在抽屉、报纸堆、旧鞋、絮窝栖居。鼠善于打洞，褐家鼠在松软的土壤可打洞长达3米，深度可达0.5米。
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